生体試料中の薬物濃度分析（TK、PK）

• 新規分析法の検討・確立
  血液、尿、糞および組織ホモジネートなどの生体試料中の被験物質やその代謝物について、除タンパク法、固相抽出法、液-液抽出法などの手段を用い、測定対象物質に適した前処理法と、LC-MS/MSおよびHPLCなどの測定条件を検討し、測定法を確立します。

• 分析
  FDAガイダンス（Bioanalytical Method Validation, May 2001）に準拠して行います。

• 生体試料中濃度測定
  安全性試験（TK）や薬物動態試験（PK）により得られた生体試料中の被験物質やその代謝物濃度を測定し、評価します。キットや抗体を供給いただければ、免疫測定法による測定も行います。また、ISR（Incured Sample Reanalysis）も実施します。

被験物質の分析

• 分析
  濃度確認、安定性、均一性および特性分析の分析（HPLC、分光光度計、ELISAなど）試験をICHガイダンスなどに準拠して実施します。

• 濃度確認、均一性、安定性、特性分析
  以下の試験をGLP適用で実施します。
  安全性試験の投与液についてHPLC、分光光度計やELISAキットなどを用いて濃度確認を行います。
  また、投与液の安定性や均一性についても試験します。被験物質（原薬や製剤）の特性分析や安定性試験を、HPLC、TLC、分光光度計、pHメータ、 カールフィッシャー水分計や浸透圧計などを用いて行います。

代謝試験

• in vivo / in vitroでの肝薬物代謝酵素活性関連試験
  カニクイザル、ラット、イヌの肝ミクロソームを用いて、以下の肝薬物代謝酵素活性測定項目 を測定します。
  • 蛋白含量（mg/g liver）
  • Cytochrome P450含量（nmol/mg protein）
  • エトキシレゾルフィンο-脱エチル化活性測定（HPLC法、CYP分子種：1A）
  • テストステロン2α-、6β-、16α-、16β-水酸化活性測定（HPLC法、CYP分子種：3Aなど）
  • デキストロメトルファンο-脱メチル化活性測定（HPLC法、CYP分子種：2D）
  • クロルゾキサゾン6-水酸化活性測定（HPLC法、CYP分子種：2E）

• 代謝酵素関連遺伝子解析(mRNAの発現解析）プローブを用いたスクリーニング毒性評価
  カニクイザルにおけるin vitroおよびin vivo代謝酵素関連遺伝子解析（mRNAの発現解析）プローブ（特許申請中）を用いたスクリーニング毒性評価が可能です。カニクイザルの様々な組織からTotal RNAを抽出し、以下の遺伝子についてリアルタイムPCRで測定します。この方法により、開発候補物質の薬物代謝酵素などに対する影響（酵素誘導及び阻害）の有無が確認できます。
  • 第 I 相反応関連（CYP 1A1、1A2、3A8、2D17、2E1、CES1）
  • 第 II 相反応関連（UGT1A01、UGT1A06、UGT1A08、UGT1A09、UGT2B18、UGT2B20、UGT2B30、HST、　PST、GSTM1、GSTM2）
  • トランスポーター関連（MDR1（ABCB1）、MRP1（ABCC1）、PEPT1（SLC15A1）、OATP1B3（SLC21A8））
  • ハウスキーピング遺伝子（β-actin、GAPDH、HPRT、B2M、PGK1）
  • その他（GSS、CTH、albumin）